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液相色譜儀可有效分析食品中的添加劑含量!

更新時間:2015-04-23      點擊次數(shù):2651
液相色譜儀色譜柱的填料和流動相的組分應按各品種項下的規(guī)定。常用的色譜柱填料有硅膠和化學鍵合硅膠。后者以十八烷基硅烷鍵合硅膠為 常用,辛基鍵合硅膠次之,氰基或氨基鍵合硅膠也有使用;離子交換填料,用于離子交換色譜;凝膠或玻璃微球等,用于分子排阻色譜等。注樣量一般為數(shù)微升。除 另有規(guī)定外,柱溫為室溫,檢測器為紫外吸收檢測器。在用紫外吸收檢測器時,所用流動相應符合紫外分光光度法。
正文中各品種項下規(guī)定的條件除固定相種類、流動相組分、檢測器類型不得任意改變外,其余如色譜柱內(nèi)徑、長度、固定相牌號、載體粒度、流動相流速、混合流動 相各組分的比例、柱溫、進樣量、檢測器的靈敏度等,均可適當改變, 以適應具體品種并達到系統(tǒng)適用性試驗的要求。
 
按各品種項下要求對儀器進行適用性試驗,即用規(guī)定的對照品對儀器進行試驗和調(diào)整,應達到規(guī)定的要求;或規(guī)定分析狀態(tài)下色譜柱的小理論板數(shù)、分離度和拖尾因子。
(1) 色譜柱的理論板數(shù)(n) 在選定的條件下,注入供試品溶液或各品種項下規(guī)定的內(nèi)標物質(zhì)溶液,記錄色譜圖,量出供試品主成分或內(nèi)標物質(zhì)峰的保留時間t(以分鐘或長度計,下同,但應取 相同單位)和半高峰寬(W ),按n=5.54(t/W)計算色譜柱的理論板數(shù),如果測得理論板數(shù)低于各品種項下規(guī)定的小理論板數(shù),應改變色譜柱的某些條件(如柱長、載體性能、色 譜柱充填的優(yōu)劣等),使理論板數(shù)達到要求。
(2) 分離度 定量分析時,為便于測量,要求定量峰與其他峰或內(nèi)標峰之間有較好的分離度。分離度(R)的計算公式為: 2(t——t) R=──W+W 式中t為相鄰兩峰中后一峰的保留時間;t為相鄰兩峰中前一峰的保留時間;W及W為此相鄰兩峰的峰寬。 除另外有規(guī)定外,分離度應大于1.5。
(3) 拖尾因子 為測量精度,特別當采用峰高法測量時,應檢查待測峰的拖尾因子(T)是否符合各品種項下的規(guī)定,或不同濃度進樣的校正因子誤差是否符合要求。拖尾因子 計算公式為:W T=────── 2d 式中W為0.05峰高處的峰寬;d為峰極大至峰前沿之間的距離。 除另有規(guī)定外,T應在0.95——1.05間。 也可按各品種校正因子測定項下,配制相當于80%、和120%的對照品溶液,加入規(guī)定量的內(nèi)標溶液,配成三種不同濃度的溶液,分別注樣3次,計算 平均校正因子,其相對標準偏差應不大于2.0%。
定量測定時,可根據(jù)樣品的具體情況采用峰面積法或峰高法。但用歸一法或內(nèi)標法測定雜質(zhì)總量時,須采用峰面積法。
 
(1) 面積歸一化法測定供試品(或經(jīng)衍生化處理的供試品)中各雜質(zhì)及雜質(zhì)的總量限度采用不加校正因子的峰面積歸一法。計算各雜質(zhì)峰面積及其總和,并求出占總峰面 積的百分率。但溶劑峰不計算在內(nèi)。色譜圖的記錄時間應根據(jù)各品種所含雜質(zhì)的保留時間決定,除另有規(guī)定外,可為該品種項下主成分保留時間的倍數(shù)。
(2) 主成分自身對照法當雜質(zhì)峰面積與成分峰面積相差懸殊時,采用主成分自身對照法。在測定前,先按各品種項下規(guī)定的雜質(zhì)限度,將供試品稀釋成一定濃度的溶液作 為對照溶液,進樣,調(diào)節(jié)檢測器的靈敏度或進樣量,使對照溶液中的主成分色譜峰面積滿足測量要求。然后取供試品溶液,進樣,記錄時間,除另有規(guī)定外,應 為主成分保留時間的倍數(shù)。根據(jù)測得的供試品溶液的各雜質(zhì)峰面積及其總和并和對照溶液主成分的峰面積比較,計算雜質(zhì)限度。
(3) 內(nèi)標法測定供試品中雜質(zhì)的總量限度 采用不加校正因子的峰面積法。取供試品,按各品種項下規(guī)定的方法配制不含內(nèi)標物質(zhì)的供試品溶液,注入儀器,再配制含有內(nèi)標物質(zhì)的供試品溶液,在同樣的條件 下注樣。記錄的時間除另有規(guī)定外,應為該品種項下規(guī)定的內(nèi)標峰保留時間的倍數(shù),色譜圖上內(nèi)標峰高應為記錄儀滿標度的30%以上,否則應調(diào)整注樣量或檢測器 靈敏度。
文章來源;http://www.chem17.com/st3887
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