液相色譜法:特指一種用液體為流動(dòng)相的色譜分離分析方法。它在經(jīng)典色譜理論的基礎(chǔ)上,采用了高壓泵、化學(xué)鍵合固定相分離柱、高靈敏檢測(cè)器等新實(shí)驗(yàn)技術(shù)建立的一種液相色譜分析法。
高壓:150-350*105Pa
:大于30000塔板/米
高靈敏:10-9g(紫外檢測(cè))、10-11g(熒光檢測(cè))
液相色譜儀與氣相色譜儀的區(qū)別:
1.分析對(duì)象的區(qū)別
GC:適于能氣化、熱穩(wěn)定性好、且沸點(diǎn)較
低的樣品;但對(duì)高沸點(diǎn)、揮發(fā)性差、
熱穩(wěn)定性差、離子型及高聚物的樣
品,尤其對(duì)大多數(shù)生化樣品不可檢測(cè)
占有機(jī)物的20%
HPLC:適于溶解后能制成溶液的樣品(包括
有機(jī)介質(zhì)溶液),不受樣品揮發(fā)性和
熱穩(wěn)定性的限制,對(duì)分子量大、難
氣化、熱穩(wěn)定性差的生化樣品及高分
子和離子型樣品均可檢測(cè)
用途廣泛,占有機(jī)物的80%
2.流動(dòng)相差別的區(qū)別
GC:流動(dòng)相為惰性,氣體組分與流動(dòng)相無(wú)親合作用力,只與固定相有相互作用。
HPLC:流動(dòng)相為液體,流動(dòng)相與組分間有親合作用力,能提高柱的選擇性、改善分離度,對(duì)分離起
正向作用。且流動(dòng)相種類較多,選擇余地廣,改變流動(dòng)相極性和pH值也對(duì)分離起到調(diào)控作用,當(dāng)
選用不同比例的兩種或兩種以上液體作為流動(dòng)相也可以增大分離選擇性。
3.操作條件差別
GC:加溫操作
HPLC:室溫;高壓(液體粘度大,峰展寬?。?/div>