1、注意正確地使用和存放色譜柱,不銹鋼柱色譜柱可選用以下的溶劑保存:正相柱用烴類溶劑,反相柱用甲醇,離子交換柱用水或甲醇/水。某些分析色譜柱要注意規(guī)定的保存條件。另外,要注意溶液的PH值,一般控制在PH2-8范圍內(nèi),其硅膠柱PH>8時(shí)會(huì)發(fā)生硅膠溶脫的情況,鍵合型柱PH<2時(shí)會(huì)發(fā)生鍵合相斷裂。
2、色譜柱污染后可采用合適的溶劑沖洗,使柱效再生。
⑴硅膠柱可以使用正庚烷、氯仿、乙酸乙酯、丙酮、乙醇和水按順序沖洗色譜柱,經(jīng)過凈化的色譜柱必須進(jìn)行水活化,即按上述相反的順序沖洗。柱再生時(shí)所需要的有機(jī)溶劑要嚴(yán)格進(jìn)行脫水處理。
⑵反相柱可以用甲醇、氯仿、正庚烷沖洗,鍵合C18柱一般用甲醇沖洗,必要時(shí)可用0.5 M EDTA鈉鹽溶液沖洗,然后用水沖洗,以達(dá)到去除柱內(nèi)鹽類。
⑶鍵合型的離子交換柱可以用緩沖溶液、水、甲醇沖洗。
3、對(duì)污染嚴(yán)重的色譜柱在沖洗無效時(shí),需將柱內(nèi)填料取出進(jìn)行處理或更換新的填料,還可以用更換柱頭填料的方法即將柱頭入口處的被污染的填料取出,重新補(bǔ)裝和柱內(nèi)同類型的填料,然后在改變柱流向進(jìn)行再生。這種逆流再生柱的方法,可以救活大部分柱子。
4、注入色譜柱的溶劑、標(biāo)液、樣品溶液都必須嚴(yán)格過濾,以去除雜質(zhì),防止堵塞色譜柱。當(dāng)用反沖洗方法無效時(shí),可將柱口過濾裝置取下,用弱酸溶液處理,去除污物或定期更換。
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