影響色譜峰展寬的因素有很多種,但不外乎柱內(nèi)和柱外兩類。柱內(nèi)因素是指色譜柱本身的性能,如柱活性大小、固定相是否與樣品發(fā)生化學(xué)反應(yīng)、柱效是否足夠高、樣品是否超載等;柱外因素主要是指接頭的死體積、進樣口和檢測器死體積等。
進樣口造成的峰展寬的原因有兩種:一是時間上的展寬,二是空間上的展寬。根據(jù)速率理論,譜峰展寬的因素包括渦流擴散、分子擴散、氣相傳質(zhì)阻力、流動相的流速等。
1.渦流擴散是指在填充色譜柱中,流動相通過填充物的不規(guī)則空隙時,其流動方向不斷地改變,因而形成紊亂的類似“渦流”的流動。由于填充物的大小、形狀各異以及填充的不均勻性,使得組分各個分子在色譜柱中經(jīng)過的通道直徑和長度不等,從而造成他們在柱中的停留時間不同,其結(jié)果就是使得色譜峰變寬。
2.分子擴散是指在試樣進入色譜柱后,在色譜柱軸向上造成濃度梯度,使得組分分子產(chǎn)生濃差擴散,主要與組分在氣相中的擴散系數(shù)大小有關(guān)。
3.氣相傳質(zhì)阻力與填充物粒度、組分在載氣流中的擴散系數(shù)有關(guān),主要是試樣在兩相界面上不能瞬間達到分配平衡,有的分子還來不及進入兩相界面就被氣相帶走,有的分子在進入兩相界面后還來不及返回氣相,這就造成了色譜峰展寬。
4.固定相傳質(zhì)阻力同氣相傳質(zhì)阻力類似,與固定液膜厚度、組分在液相中的擴散系數(shù)有關(guān),不過它是發(fā)生在氣液界面和固定相之間的,也會引起色譜峰的擴張。